蛋白分离器怎么使用？
我们实验室用的是LKB超滤系统，型号是ProSep 5050-PRO。具体的使用方法可以参考仪器说明书，我这里介绍一下使用过程中需要注意的地方和常见问题的解决方式：
1、使用蛋白分离器前先加入过滤介质（聚丙烯酰胺）至容器中，并用玻璃棒搅拌使介质均匀分布。然后加入缓冲液，待液体充满容器并均匀后盖上盖子，确保整个系统密封。注意：使用的缓冲体液量以刚好覆盖滤膜为准。因为如果缓冲溶液的量太多，在后续的操作中会因为溶解的蛋白质过多而导致不能很好的过滤；而如果缓冲溶液的量太少，则可能会因为无法充分覆盖滤膜而导致过滤失败或者需要延长过滤的时间。
2、连接好仪器的管线，检查气密性，开始过滤。在过滤的过程中可以观察一下滤出液的色泽，根据不同的试验情况可以选择性地添加一些试剂进行脱色处理。一般经过4-6次过滤，所得滤液即可达到比较清亮的目的。有些情况下可能只需要过滤三次即可。
3、当所需滤过的溶液全部被过滤完后，用玻璃棒轻轻搅动介质层，使附着在介质表面上的残余溶液得以流动从而使其进入滤膜从而起到清洗的作用。然后用洗瓶以一定的流速冲洗膜两侧，避免凝胶块或聚合物颗粒堵塞滤膜。 注意：在整个过滤操作过程中应避免气泡停留在滤膜上，防止形成气泡带，影响过滤效率。 常见的错误：很多新手在做蛋白分离的时候习惯把液体灌得满满的，其实这是很不科学的。因为这样会使得部分溶质分子聚集而成溶胶状态，反而使有些分子无法通过滤膜，导致浪费样品又得不到预期的效果。