狗狗冠状是什么病？
犬冠状病毒（Canine coronavirus，CCoV）是引起犬急性传染病之一——传染性胃肠炎的主要病原体。 该病毒具有囊膜，直径为80～160nm[2]，呈哑铃形或弯曲状。有囊膜和脂质双分子层的外膜与宿主细胞结合，使病毒能免受宿主的防御系统的攻击。外膜蛋白（M）是冠状病毒主要的结构蛋白，是病毒的抗原成分，可以诱导机体的免疫应答反应。其核衣壳蛋白（N》)是冠状病毒的另一种主要结构蛋白质，能够促进RNA在细胞质中的转移、组装并维持病毒的基因完整性，并且介导病毒感染细胞的侵入过程；N’蛋白参与病毒的复制周期，对病毒的生长具有重要作用L3」。冠状病毒基因组为不分节段的单股正链RNA(+ssRNA)，全长约27.5 kb，编码4种蛋白质：主蛋白（P）、基质蛋白（M）、包膜蛋白（E）和小肠蛋白（S），以及多种RNA酶。其中，M和S分别构成病毒的囊膜和胞膜，在病毒的组装过程中发挥关键作用[4-5]。
病毒通过粪便排出体外，经口感染易感动物。一般情况是通过消化道感染，但也能通过呼吸道或者损伤的皮肤组织感染。CCoV潜伏期通常为1~5 d，在自然条件下，病毒可在环境中存活2周左右，在尿粪中可存活数周至数月[6]。 CCoV的感染对象广，包括犬、猫和水貂等，不同年龄段的动物都可被感染。该病发病率高，传播迅速，死亡率可达50%以上。
一、流行病学特征
1．传染源
被CCoV感染的犬是本病的唯一传染源[7-9](图1)。患病犬和康复犬都可以成为本病的传染源，而隐性感染的犬不是本病的传染源L1OJ。研究表明，患病犬的排泄物中含有大量的CCoV，且可以在粪便中持续排毒达50d之久[11]。
2．传播途径
该病主要通过消化道传染，也可通过呼吸道感染[12】，还可以通过接触受污染的物体间接传播。 患病犬的腹泻物中含有大量的CCoV，可通过直接接触或通过尘埃进行传播。病犬排出的粪便中含有大量活毒株，当环境中有其他健康犬进入时，这些粪便就可能沾染到幼犬的四肢和身体上，进而通过舔舐、吸吮等动作将病毒摄入体内引发感染，所以幼龄犬更容易被感染。患病犬的尿液也可以排出病毒[13}，而尿液中的游离病毒数量比粪便中的游离病毒的数量更多，因此，可能通过尿粪污染的环境造成疾病的传播风险增大。当患犬与健康犬同时使用便池时，健康犬可能会接触到含病毒的粪便或尿液而遭感染[14]。患病犬的呕吐物和唾液中也含有一定数量的CCoV，也可能导致疾病的发生和传播[15]。 在本病的潜伏期中，病毒可通过呼吸道进行传播。患犬呼出的气溶胶中含有大量的冠状病毒，健康犬吸入后可导致感染发病。患病犬的呼吸道分泌物中也能够检测到CCoV的存在，说明也可以通过呼吸道进行传播[16]。也有研究认为，本病可以通过胎盘垂直传播给妊娠母犬及胎儿，因此，胎儿也可能会受到感染[17]。当饲养员手接触了感染犬的排泄物后没有及时洗手就触摸健康犬只，也有可能引起健康犬发生感染。
二、临床症状及病理变化
CCoV引起的传染性胃肠炎的临诊症状主要表现为腹泻，部分伴有呕吐，常呈流行性分布。患病幼犬体温升高至39℃～41℃，精神沉郁，食欲不振甚至废绝。由于幼犬体内的营养物质储存量有限，患病幼犬因营养不良而逐渐消瘦，体重下降明显，有的甚至会危及生命【"。成年犬的临床症状相对较轻。当机体抵抗力下降时可出现便秘现象并伴有轻度腹泻，病程一般为1 周左右。
三、诊断
目前对于本病的确诊主要以实验室检查为主。 （一）病原学检测 在患病犬的粪便中分离到的CCoV与致病性犬冠状病毒标准株有高度同源性{19]，所以可以在粪便样本中发现相应的病毒颗粒并进行培养。
为了确定粪样中含有足够的CCoV病毒用于PCR实验，可以先取少量粪样制成匀浆液进行RT-PCR初步检验，阳性结果则表明所取样品中具备足够的病毒量用于后续的PCR扩增试验。
为了更准确的确认粪便中是否存在CcOV，可以将粪便稀释液接种于细胞传代培养，然后收集传代后的细胞悬液，提取出细胞总RNA，反转录成cDNA进行PCR扩增，阳性结果说明粪便中存在CCoV。
如果怀疑粪便样本中的病毒含量不够足，可以进行粪便离心沉淀后再重新制作匀浆液进行PCR扩增，提高阳性检出率。 粪便样本采集后要尽快进行操作，否则病毒会很快失去活性。
（二）病毒核酸扩增检测技术 目前，常用的核酸检测方法有反转录聚合酶链式反应、荧光定量反向 PCR 和实时荧光定量 PCR L2i}]。 反转录聚合酶链式反应是目前最常用的病毒核酸检测技术，它可以检测出极微量的病毒，而且敏感性极高，但也会存在一定的假阳性和假阴性。
荧光定量PCR技术在原理上与反转录聚合酶链式反应相似，但其特异性更好一些，灵敏度更高，操作起来也更方便，而且不需要纯化模板RNA就可以进行检测。 实时荧光定量PCR技术与前两种相比，最大的特点就是实现了在分析过程中对反应体系中特异性荧光信号的实时监测，因而大大提高了